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第十节 烧伤湿性医疗技术MEBO的抗菌作用实验研究(续)

编辑:中国中西医结合学会烧伤专业委员会 出版社:中国医药科技出版社 发行日期:2000年6月

[摘要] 目的:观察MEBO(含100%MEBO,以下简称MEBO)对烧伤常见细菌变形杆菌、大肠杆菌、绿脓杆菌和金黄色葡萄球菌的作用。方法:将上述细菌接种在普通琼脂培养基上,并在接种的细菌表面涂上一层MEBO,置37℃,20h~22h观察。结果:MEBO使上述细菌的形态结构发生变异。与在含25%MEBO和含50%MEBO的培养基上细菌形态变异现象相比较,无论细菌形态变异出现的时间和形态变异的特点都有明显差别。结论:MEBO具有较强的抗菌作用。

[关键词] MEBO 细菌 形态变异 血浆凝固酶

已有实验报道观察了变形杆菌、大肠杆菌、绿脓杆菌和金黄色葡萄球菌在含有25 %MEBO和50%MEBO培养基上形态结构等特性的变异现象。本实验是模拟临床烧伤病人创面涂抹一定厚度MEBO的用药方法而设计的。实验观察了MEBO使上述细菌发生形态变异的现象,比在含25%MEBO和含50%MEBO培养基上的形态变异现象出现得早,形态变异特点也有差别,进一步验证了MEBO的抗菌作用。

材 料 和 方 法

1. 材料

MEBO: 北京光明中医烧伤创疡研究所研制。菌种:大肠杆菌、变形杆菌和金黄色葡萄球菌(由本室提供)、绿脓杆菌(由滨州医学院附属医院院检验科提供)。营养琼脂:北京市海淀区微生物培养基制品厂。

2. 实验方法

制备普通琼脂培养基。将上述4种细菌分别密集划线接种于普通琼脂培养基上。接种细菌的面积约5cm×3cm。再将挤出的MEBO放于培养基中未接种细菌的部位,分别用无菌的取菌环取MEBO以密集划线法涂布于已接种细菌的表面。然后,将培养基置37℃培养箱。20~22h为一代进行传代,传10~15代。每代细菌都在涂抹MEBO的细菌处2~3个不同部位取菌涂片、染色,观察形态变化。做金黄色葡萄球菌血浆凝固酶试验,观察绿脓杆菌色素变化。

3. 检测指标

(1) 观察MEBO对变形杆菌、大肠杆菌、绿脓杆菌和金黄色葡萄球菌等形态结构的影响。

(2) 对上述4种细菌在MEBO和在含25%MEBO、50%MEBO培养基上细菌的形态结构、变异特点进行比较。

结 果

1. MEBO对4种细菌形态变异的影响

(1) MEBO对变形杆菌形态变异的影响(见表5-10-1)

37℃,20~22h培养后进行观察比较。实验结果表明MEBO对上述4种细菌在导致形态变异,使绿脓杆菌色素消失,和使金黄色葡萄球菌血浆凝固酶产生能力减弱等方面都比25%MEBO和50%MEBO的作用显著,而且出现早,形态变异的特点也有差异。实验结果与以前报道的不同浓度的MEBO的抗菌作用是一致的。MEBO的药效是与MEBT配合时产生的。

从表5-10-1~4中还可以看出,将每种细菌具有共同形态变异特点的归为一组,这是较粗的分组,因为细菌在MEBO的作用下,传代的代数不同,以及同一代的细菌接触MEBO的量的多少不同,在形态变异方面是有差别的。上述细菌发生形态结构的变异现象,说明了细菌的代谢和生理等特性的改变与它所处的环境有密切关系。

多种细菌均能在没有基因改变的情况下发生形态结构等方面的变异。这种非遗传性变异到目前为止除对诱导酶所引起的变异了解得比较深入外,其他变异现象的发生机制尚不十分清楚。但有充分证据说明分裂是受复制的控制。从上面现象也说明,细胞分裂对MEBO药物非致死因子作用的敏感性,比蛋白质、DNA、RNA合成和膜的形成更敏感,导致形成长杆菌和多核丝状细胞。这种非遗传性变异在适宜条件下经过一段时间可以恢复。但上述杆菌在MEBO的作用下连续传代,最后形成比原代菌小的杆菌或近似圆球形的细菌,多数细菌菌体可见着色深的颗粒。说明细菌在MEBO环境中最终导致了细菌的代谢合成速度减慢,影响了细菌生长繁殖速度。又如金黄色葡萄球菌血浆凝固酶产生明显减弱,这些都能影响细菌的毒性作用。

实验结果进一步说明了MEBO比含25%MEBO和含50%MEBO的抗菌作用都强。至于上述细菌变异现象的产生机制尚须深入探讨研究。

    

(曲云英等)

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